产品名称:人胃平滑肌细胞
产品特点:人胃平滑肌细胞公司正在出售的产品人胚肺成纤维细胞;MRC-5 人胚皮肤成纤维细胞;CCC-ESF-1 AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A2) Heteroimer 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 ASGR2 Others Human 人 ASGR2 人细胞裂解液 人淋巴内皮细胞 (HLEC)
产品型号:
更新日期:2024-12-19
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人胃平滑肌细胞的详细资料:
细胞简介:
胃是人体的消化器官,位于膈下,胃壁由黏膜、黏膜下层、肌层和外膜四层组成,并有神经、血管和管的分布。其中平滑肌主要位于肌层中,胃的肌层发达,由内斜、中环和外纵三层平滑肌构成。其中,中层环形平滑肌在幽门处增厚,形成幽门括约肌,具有节制胃内容物排出的作用。
胃动力性的发生与平滑肌的收缩性的改变密切相关,现已有充分证据说明, Cajal间质细胞是胃部运动的起搏细胞,它存在于环形肌与纵行肌之间,并紧靠肌间神经丛;同时Ca2+在平滑肌的收缩中起着重要的信使作用,这些都是胃动力性研究中的重要方向。
产品名称 | 人胃平滑肌细胞 | 组织来源 | 胃组织 |
英文名称 | Primary human gastric smooth muscle cells | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
细胞特性:
1) 细胞来源于人正常胃组织。
2) 细胞鉴定:平滑肌肌动蛋白(α-SMA)荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式:长梭状细胞,贴壁培养。
推荐培养基:
永利集团网址推荐使用 Delf原代平滑肌细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和永利集团网址联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm离心3 min,弃上清。加5 mL PBS重悬细胞,再900 rpm-1000 rpm离心3 min,,用新鲜的*培养基重悬细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和永利集团网址联系,告知细胞的具体情况,以便永利集团网址的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1:2传代 。
9.注意: 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。
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