细胞简介：

腹膜是指在存在高等脊椎动物腹腔中的一层浆膜，主要由间皮及其外面的结缔组织构成。腹膜包覆大部分腹腔内的器官，能分泌黏液润湿脏器的表面，减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、和神经组织经由腹膜与外界相连。腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。

微血管内皮细胞呈单层覆盖于微血管表面，构成血管内外物质交换的一种重要屏障，是循环血流动力和血液中危险因素的主要靶点。

细胞特性：

1）组织来源于手术后的腹膜组织。

2）细胞鉴定：vWF与角蛋白荧光染色为阳性。

3）经鉴定细胞纯度高于90%。

4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。

5）细胞生长方式：铺路石样细胞，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

永利集团网址推荐使用 delf原代 内皮 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠β-转导重复相容蛋白(β-CP)检测试剂盒 ，英文名： β-CP ELISA Kit

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CLIAKitforIL-16(HumanIerleukin16)ELISAKIT人白介素16

通用型硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitBK大鼠血管舒缓

CD70重组大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (His 标签) Protein

FADD (Fas-associated protein with death domain 0.5mgFADD (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡结构域相关蛋白抗原

ST6GAL1重组人 ST6GAL1 / CD75 蛋白 (His 标签) Protein

FGF14 Protein Human 重组人 FGF14 / SCA27 蛋白 (isoform 1B)

TLR3 Protein Mouse 重组小鼠 TLR3 / CD283 蛋白 (His 标签)

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小鼠抵抗素(Resistin)ELISA 试剂盒

Rat Neuroglobin (NGB) ELISA Kit 大鼠脑红蛋白(NGB)检测试剂盒

humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人状瘤病毒抗体IgG(HPV-IgG)检测试剂盒 进口分装

HumanarylsulfataseA,ASA检测试剂盒人芳基酯酶A(ASA)检测试剂盒

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人腹膜微血管内皮细胞无水碳酸钙   100g

Calciumte,Anhydrous   500g

化钙   100g

CalciumChloride,Dihydrate   500g

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和永利集团网址联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和永利集团网址联系，告知细胞的具体情况，以便永利集团网址的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。