产品名称：人肺癌成纤维细胞

英文名称：Human Pulmonary Cancer Fibroblast Cells

组织来源：肺癌

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人肺癌成纤维分离自肺癌组织；肺癌是常见的肺原发性恶性肿瘤，绝大多数肺癌起源于支气管粘膜上皮，故亦称支气管肺癌。肺癌可向四周乃至全身扩散。肺癌发病率和死亡率增长快，对人群健康和生命威胁大的恶性肿瘤之一。近50年来许多国家都报道肺癌的发病率和死亡率均明显增高，男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶性肿瘤的位，女性发病率占位，死亡率占位。肺癌的病因至今尚不明确，大量资料表明，长期大量吸烟与肺癌的发生有非常密切的关系。肺癌，其实不是一种病，而是几十种病的组合，有多种亚型，多种特性；根据肺癌细胞在显微镜下的形态特点，可以初步分为两种类型：小细胞肺癌(SCLC)15%和非小细胞肺癌(NSCLC)85%。这两种类型肺癌的生长特点、扩散风险和治疗方案均不相同。绝大多数肺癌是非小细胞肺癌，约占85%。它又能进一步被分为三类，分别是：腺癌，鳞癌和大细胞癌。其中腺癌是主要的类型，约占非小细胞肺癌中的50%。如果是不吸烟的女性患者，几乎全部都是腺癌。人肺癌成纤维是肺癌组织中的癌相关成纤维细胞，癌相关成纤维细胞(cancer associated fibroblast，CAF)在肿瘤微环境中的重要作用已受到广泛的重视。该细胞通过与癌细胞的直接接触、分泌多种因子以及对肿瘤基质的改造，促进肿瘤的发生、发展、转移甚至耐药性的发生。随着研究的深入，有人提出CAF可能成为抗肿瘤治疗的新靶点。然而CAF的分化来源多样，相应的形态和功能各异，因此深入了解CAF的分化来源有利于更全面地认识肿瘤发展的机制，为临床治疗提供理论依据，体外培养肺癌成纤维细胞对肺癌研究有重要意义。

实验室分离的人肺癌成纤维采用 - 胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的人肺癌成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

人肺癌成纤维体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

猪圆环病毒2型抗体ELISA检测试剂盒

People four arachidonic acid (AA) ELISA Kit 人花生四烯酸(AA)检测试剂盒

RabbitPlateletFactor4,PF-4ELISAKit 兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAPC(HumanactivatedproteinC)ELISAKit人活化蛋白C

血清脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感比色法定量检测试剂盒20次

Porcineierleukin3,IL-3ELISAKit猪白介素3(IL-3)检测试剂盒规格：96T/48T

F11R重组大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 标签) Protein

GFP 绿色荧光蛋白 0.5mgGFP 绿色荧光蛋白

IL1B重组人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 标签) Protein

CDK2AP2 Protein Human 重组人 CDK2AP2 蛋白

CDNF Protein Mouse 重组小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白

GFP 绿色荧光蛋白 0.5mgGFP 绿色荧光蛋白

CDK2AP2 Protein Human 重组人 CDK2AP2 蛋白

F11R重组大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 标签) Protein

CDNF Protein Mouse 重组小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白

IL1B重组人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 标签) Protein

小鼠(Pepsin)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human phospholipase C gamma chain (PLC 1) ELISA Kit 人0酯酶Cγ链(PLCγ1)检测试剂盒

HumanNa+/H+exchanger3,NHE3ELISAKit 人Na+/H+交换体3(NHE3)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenIerleukin2,IL-2检测试剂盒鸡白介素2(IL-2)检测试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞HISTONEH3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

Mouseglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit小鼠谷脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)检测试剂盒规格：96T/48T

人肺癌成纤维细胞小鼠仙台病毒（Sendai）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠细小病毒（CPV）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装