① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：人输尿管上皮细胞

英文名称：Human Ureteral Epithelial Cells

组织来源：尿道组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人输尿管上皮分离自输尿管组织；输尿管上接肾盂，下连膀胱，是一对细长的管道，呈扁圆柱状，位于腹膜后，为一肌肉粘膜所组成管状结构，沿腰大肌内侧的前方垂直下降进入骨盆。输尿管有三个狭窄部：一个在肾盂与输尿管移行处（输尿管起始处）；一个在越过小骨盆入口处；后一个在进入膀胱壁的内部。这些狭窄是结石、及坏死组织容易停留的部位。输尿管——膀胱连接处有一种特殊结构，即瓦耳代尔鞘，它能有效地防止膀胱内尿液返流到输尿管。临床上将输尿管分为上、中、下三段，也可称为腹段、盆段、膀胱段。其中，腹段自肾盂输尿管交界处，到跨越髂动脉处；盆段，自髂动脉到膀胱壁；膀胱段，自膀胱壁内斜行至膀胱粘膜、输尿管开口。输尿管管壁分为4层，黏膜层、固有层、肌层、外膜。黏膜层表面为移行上皮，约有4-5层细胞；固有层由细密的结缔组织构成，内含胶原纤维和少量弹性纤维；输尿管肌层主要由内纵和外环两层平滑肌组成；外膜为疏松结缔组织，营养血管由外膜进入输尿管。其中，输尿管上皮细胞主要分布于黏膜层。

公司实验室分离的人输尿管上皮采用先消化、然后机械分离法使输尿管分层、后胶原酶消化，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的人输尿管上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

小鼠酸性成纤维生长因子(mouse a-FGF)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠碱性成纤维生长因子(mouse b-FGF/FGF-2)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠Fibronectin（mouse Fibronectin）   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠Flt3(mouse Flt3)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠胎盘生长因子(PLGF)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat activin A (Activin-A) ELISA Kit 大鼠活化素A(Activin-A)试剂盒

Humangeneralanscriptioncomplex,GTCELISAKit 人通用转录复合体(GTC)试剂盒 96T/48T 进口分装

Deererythrocytemembraneprotein,EMP试剂盒红细胞膜蛋白(EMP)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞脘蛋白(PRION)蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit小鼠内皮型合成酶(eNOS)试剂盒规格：96T/48T

EPHA3重组小鼠 EphA3 蛋白 Protein

降钙素(CT)重组蛋白 Recombinant Calcitonin (CT)

CKM重组人 CKM / CK-MM 蛋白 Protein

CHST15 Protein Human 重组人 CHST15 / GALNAC4S-6ST / BRAG 蛋白

MET Protein Canine 重组狗 c-MET / HGFR 蛋白

降钙素(CT)重组蛋白 Recombinant Calcitonin (CT)

CHST15 Protein Human 重组人 CHST15 / GALNAC4S-6ST / BRAG 蛋白

EPHA3重组小鼠 EphA3 蛋白 Protein

MET Protein Canine 重组狗 c-MET / HGFR 蛋白

CKM重组人 CKM / CK-MM 蛋白 Protein

人输尿管上皮细胞大鼠生长调节致癌基因γ(GROγ)试剂盒 ，英文名： GROγ ELISA Kit

Mouse vitamin E (VE) ELISA Kit 小鼠(VE)试剂盒

RatHistamine,HISELISAKit 大鼠组胺(HIS)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHDELISAKit大鼠组织蛋白去乙酰化酶

细胞VEGFR1(FLT-1)激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitα-BGTα-银环蛇毒素

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用